培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎,直接影響微生物試驗結果,而成品預裝培養(yǎng)基是培養(yǎng)基中的一種,是由脫水培養(yǎng)基*溶解于水中,矯正PH值,然后滅菌和分裝于平皿而成。無論是實驗室配制的培養(yǎng)基或商品化的成品預裝培養(yǎng)基,其質量都依賴于其制備的整個過程。采用不適宜方法制備的培養(yǎng)基將影響微生物的生長或復蘇,從而影響試驗結果的可靠性。所以要確保培養(yǎng)基的質量,需特別注意以下事項:
1.選擇適宜的培養(yǎng)基制備方法,不得使用結塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基。
2.培養(yǎng)基滅菌應按照生產商提供的或經驗證的參數進行,避免采用不適當的加熱和滅菌條件,而引起培養(yǎng)基顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH值的改變。
3.應確定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH值(冷卻至室溫25℃測定)。若培養(yǎng)基處方中未列出pH值的范圍,除非經驗證表明培養(yǎng)基的pH值允許的變化范圍很寬,否則,pH值的范圍不能超過規(guī)定值±0.2。
4.成品預裝培養(yǎng)基應確保無菌,并且平皿不得破裂,盡量避免形成氣泡,固體培養(yǎng)基表面不得產生裂縫或漣漪,在冷藏溫度下不得形成結晶,不得污染微生物等。
5.培養(yǎng)基升溫滅菌過程中溫度上升緩慢或滅菌后降溫過慢,可能導致培養(yǎng)基的過熱或過度滅菌,一定程度上會降低微生物培養(yǎng)基促生長的質量,所以成品預裝培養(yǎng)基應通過微生物促生長試驗進行驗證。
6.用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基必須特別防護,最好采用三層包裝和終端滅菌。不建議采用實驗室自制的培養(yǎng)皿通過100%預培養(yǎng)后用于潔凈區(qū)環(huán)境采樣,因為預培養(yǎng)過程中失水會影響微生物生長,且還存在培養(yǎng)皿被污染的可能。
7.貯藏和運輸條件應使成品培養(yǎng)基較低限度的失去水分并提供機械保護、避光保存。含瓊脂培養(yǎng)基不得在0℃或0℃以下存放,冷凍可能破壞凝膠特性。
培養(yǎng)基制備過程質量控制和貯藏條件是提供優(yōu)質培養(yǎng)基的保證。潔凈區(qū)環(huán)境浮游菌、沉降菌及表面微生物監(jiān)測用培養(yǎng)基一般采用胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA),必要時可加入適宜的中和劑;當監(jiān)測結果有疑似真菌或考慮季節(jié)因素影響時,可增加沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)。