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新品上市丨還在不斷實(shí)驗(yàn)優(yōu)化顯色結(jié)果? 這篇IHC秘籍快來(lái)收好!

更新時(shí)間:2023-11-09  |  點(diǎn)擊率:462

 





免疫組化(IHC作為實(shí)驗(yàn)技能之一,具有特異性強(qiáng),靈敏度高,將形態(tài)、功能和定位密切結(jié)合等優(yōu)勢(shì),現(xiàn)已成為臨床病理的輔助手段。但其實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣,存在許多變量,經(jīng)常很難獲得的結(jié)果,因此需要對(duì)一些實(shí)驗(yàn)流程的變量(例如樣品制備、抗原修復(fù)以及抗體孵育時(shí)間等)進(jìn)行調(diào)整實(shí)現(xiàn)優(yōu)化。

IHC實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣,包括切片制作(固定,脫水,透明,包埋,切片,貼片,烤片),脫蠟,水化,阻斷,抗原修復(fù),封閉,一抗孵育,二抗孵育,顯色,復(fù)染,封片和分析等,在上次的推文中向您介紹了封閉和一抗孵育兩個(gè)步驟中的常見(jiàn)問(wèn)題及解析,本次為您帶來(lái)的是二抗孵育和顯色過(guò)程中的注意事項(xiàng)。文末還附有IHC通關(guān)的秘密——Bioss全新上市的IHC即用型試劑盒,助您一次獲得CNS級(jí)的圖像結(jié)果。



二抗孵育


1.陽(yáng)性檢測(cè)率及著色強(qiáng)度相對(duì)減弱,甚至無(wú)染色

2.圖片背景值過(guò)高

3.染色結(jié)果出現(xiàn)非特異性染色

4.DAB顯色時(shí)間很短(如幾秒或幾十秒)就出現(xiàn)很深的棕褐色


顯色

1.陽(yáng)性檢測(cè)率及著色強(qiáng)度相對(duì)減弱,甚至無(wú)染色

2.圖片背景值過(guò)高

3.產(chǎn)生深棕至黑色的DAB絮狀或團(tuán)狀沉積

4.陽(yáng)性檢測(cè)率及著色強(qiáng)度相對(duì)增強(qiáng)

5.切片著色不均勻,如一片著色,一片不著色或著色深淺不一

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受篇幅限制,本次IHC實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題解析就先分享到這里。如果您還想更深入的學(xué)習(xí)IHC相關(guān)問(wèn)題,可以繼續(xù)關(guān)注本系列后續(xù)文章。Bioss供應(yīng)科研使用高品質(zhì)IHC抗體及全套配套試劑,為您提供一站式解決方案。如果您在使用我們的產(chǎn)品時(shí)出現(xiàn)任何問(wèn)題,請(qǐng)隨時(shí)聯(lián)系我們,Bioss資深IHC實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家將為您全面講解,深度分析,幫助您輕松解決IHC的“疑難雜癥"!

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